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組織芯片服務(wù)具體步驟與檢定注意事項(xiàng)技術(shù)科普
更新時(shí)間:2024-08-01   點(diǎn)擊次數(shù):867次
   組織芯片(Tissue Microarray, TMA)技術(shù)是一種高通量的生物樣本分析技術(shù),它允許研究人員在單一載玻片上同時(shí)分析多個(gè)組織樣本,從而顯著提高了實(shí)驗(yàn)效率和樣本利用率。

  一、組織芯片服務(wù)具體步驟

  樣本選擇與收集

  根據(jù)研究目的選擇具有代表性的組織樣本,這些樣本可以來(lái)自不同的患者、疾病階段或治療反應(yīng)組。

  對(duì)選定的樣本進(jìn)行收集,并確保其完整性和代表性。對(duì)于石蠟包埋的組織樣本,需要保留足夠的蠟塊以供后續(xù)操作。

  樣本標(biāo)記與定位

  對(duì)收集到的組織樣本進(jìn)行病理學(xué)評(píng)估和標(biāo)記,以確定待研究的目標(biāo)區(qū)域。這通常涉及使用顯微鏡觀(guān)察并確定具有特定病理特征的區(qū)域。

  使用標(biāo)記筆或其他方法在樣本上標(biāo)記出目標(biāo)區(qū)域,以便在后續(xù)步驟中準(zhǔn)確取芯。

  組織芯取樣與排列

  使用專(zhuān)用的組織芯片點(diǎn)樣儀或打孔機(jī)從標(biāo)記好的組織樣本中取出微小組織芯(通常直徑在0.6-2.0mm之間)。

  將取出的組織芯按照預(yù)定的設(shè)計(jì)排列在空白蠟塊模上,形成組織芯片陣列。排列時(shí)需注意相鄰樣本之間的距離,以避免切片時(shí)的交叉污染。

  蠟塊融合與切片

  將排列好的組織芯與受體蠟塊融合成一體,通常在55℃溫箱中進(jìn)行加溫處理。此時(shí)需嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,以確保組織芯不易掉片、滑片,同時(shí)防止受體蠟塊融化移動(dòng)組織芯位置。

  使用切片機(jī)對(duì)融合后的蠟塊進(jìn)行連續(xù)切片,獲得組織芯片切片。切片厚度通常為4-8μm,具體厚度可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整。

  染色與分析

  對(duì)切片進(jìn)行染色處理,常用的染色方法包括蘇木精-伊紅染色(HE染色)、免疫組織化學(xué)染色(IHC染色)等。染色后使用顯微鏡觀(guān)察切片并進(jìn)行分析。

  根據(jù)分析結(jié)果對(duì)組織芯片進(jìn)行評(píng)估,包括目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平、細(xì)胞形態(tài)變化等,從而得出研究結(jié)論。

  二、檢定過(guò)程中需要注意的事項(xiàng)

  樣本質(zhì)量與處理

  確保收集到的組織樣本具有代表性和完整性,避免因樣本質(zhì)量問(wèn)題導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

  在處理樣本過(guò)程中,注意避免污染和損傷,確保樣本的病理特征得以保留。

  組織芯取樣與排列精度

  在取樣過(guò)程中,確保打孔針或取樣器的精度和穩(wěn)定性,避免組織芯的損壞和碎裂。

  在排列組織芯時(shí),注意控制相鄰樣本之間的距離和排列的整齊度,以確保切片的準(zhǔn)確性和可比性。

  蠟塊融合與切片質(zhì)量

  在蠟塊融合過(guò)程中,嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間條件,確保組織芯與受體蠟塊的良好融合。

  在切片過(guò)程中,注意切片的連續(xù)性和厚度均勻性,避免因切片質(zhì)量不佳而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

  染色與分析的標(biāo)準(zhǔn)化

  采用標(biāo)準(zhǔn)化的染色方法和操作流程進(jìn)行切片染色處理,確保染色結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  在分析過(guò)程中注意避免主觀(guān)因素的影響,采用客觀(guān)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。

  安全與防護(hù)

  在組織芯片服務(wù)過(guò)程中注意實(shí)驗(yàn)室安全和個(gè)人防護(hù)措施的落實(shí),避免有害物質(zhì)的接觸和吸入。

  定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行消毒和清潔處理,保持實(shí)驗(yàn)室的整潔和衛(wèi)生。

  組織芯片服務(wù)涉及多個(gè)精細(xì)步驟和注意事項(xiàng)。遵循正確的操作步驟和注意檢定過(guò)程中的細(xì)節(jié)問(wèn)題對(duì)于獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要。在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)具體研究需求選擇合適的服務(wù)流程和技術(shù)方法,并嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行操作和分析。

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