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fish技術(shù)服務(wù)

更新時(shí)間:2024-09-26

簡(jiǎn)要描述:

fish技術(shù)服務(wù)早期一般用于了解基因或染色體發(fā)生擴(kuò)增、缺失、融合或斷裂,適用于:產(chǎn)前診斷、產(chǎn)后遺傳病檢測(cè)、腫瘤診斷及預(yù)后評(píng)估等。樣本來(lái)源廣泛:組織、脫落細(xì)胞、羊水、血液、骨髓都可以檢測(cè),且不僅限于新鮮樣本,2-3年的石蠟樣本都可以檢測(cè)。

   FISH(熒光原位雜交)技術(shù)是一種利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子雜交,以熒光顯微鏡觀察來(lái)確定與特異探針雜交后被染色的細(xì)胞或細(xì)胞器的形態(tài)和分布的技術(shù)。其基本原理是堿基互補(bǔ)配對(duì),即帶有熒光物質(zhì)的探針與目標(biāo)DNA按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行雜交,形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸。

  步驟

  FISH技術(shù)的主要步驟如下:

  樣本準(zhǔn)備:收集需要檢測(cè)的細(xì)胞或組織樣本,并進(jìn)行固定和預(yù)處理,保持核酸的完整性和穩(wěn)定性。

  探針設(shè)計(jì):設(shè)計(jì)和合成與目標(biāo)核酸序列互補(bǔ)結(jié)合的熒光探針,這些探針通常包括與目標(biāo)序列互補(bǔ)的熒光標(biāo)記物。

  雜交:將熒光探針與樣本中的核酸序列進(jìn)行雜交反應(yīng),優(yōu)化反應(yīng)條件以確保探針的特異性和靈敏度。

  洗滌與顯微觀察:雜交后洗滌樣本以去除非特異性雜交的探針,在熒光顯微鏡下觀察樣本,記錄探針的結(jié)合位置和強(qiáng)度。

  數(shù)據(jù)分析:對(duì)熒光顯微鏡觀察到的結(jié)果進(jìn)行分析,確定探針的結(jié)合位置、數(shù)量等參數(shù)。

  分析方法

  FISH技術(shù)的數(shù)據(jù)分析主要包括:

  探針定位分析:通過(guò)觀察熒光信號(hào)在細(xì)胞或組織中的位置,確定目標(biāo)DNA序列的定位。

  熒光強(qiáng)度分析:熒光信號(hào)的強(qiáng)度可以反映目標(biāo)DNA序列的數(shù)量或濃度,從而進(jìn)行定量分析。

  形態(tài)學(xué)分析:通過(guò)觀察熒光信號(hào)的形態(tài)和分布模式,可以了解細(xì)胞或組織的結(jié)構(gòu)和特征。

  FISH技術(shù)還可以結(jié)合其他技術(shù)如光譜分析、圖像處理等進(jìn)行更深入的研究。

  FISH技術(shù)以其高靈敏度、高特異性和直觀性在生命科學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用,特別是在基因組學(xué)、遺傳學(xué)以及醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

 

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